细胞工程和胚胎工程问题解析

秦四哥

1在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？

植物组织培养中用到的培养基含有丰富的营养成分，有利于培养物的生长，然而各种杂菌同样也可以在上面迅速生长，所以植物组织培养过程中经常发生污染现象。培养基一旦被污染，各种杂菌迅速生长不但会和培养物争夺营养，而且这些杂菌在生长过程中会生成大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡。外植体带菌、培养瓶和各种器械灭菌不彻底、操作人员操作不规范等，都可以造成培养基污染。所以，在组织培养实验中用到的植物材料和各种器械都要进行彻底灭菌，实验人员操作一定要规范，避免带入杂菌。

2为什么要在避光条件下培养愈伤组织？

对于植物组织培养来说，光照条件非常重要，包括光照强度、时间和波长。但在愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养，而在分化再生的过程中一定要有光照。愈伤组织诱导阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产生愈伤组织，而在光照条件下则容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织。

3为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？

血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清中的激素有胰岛素、生长激素等，还有多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%~20%的血清。

4植物组织培养的培养基为什么添加蔗糖而不是葡萄糖？

主要有三个原因：①这是由于蔗糖比葡萄糖能更好地调节培养基渗透压，配制相同质量分数的培养基，蔗糖形成的渗透压要明显低于葡萄糖，而若采用葡萄糖作为碳源，易使植物细胞脱水而死亡；②微生物生长所需的碳源最常用的是葡萄糖，很少利用蔗糖。因此，采用蔗糖作为培养基的碳源，可降低微生物污染概率；③在培养时，增加蔗糖浓度可诱导植物初皮部形成。因此，在植物组织培养中要选蔗糖而不选葡萄糖。

5为什么“番茄-马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想象的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？

马铃薯-番茄没有像人们预想的那样地上长番茄、地下结马铃薯，主要原因是：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯-番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。

6植物组织培养与无土栽培的培养基有何区别？

植物组织培养一般用固体培养基，培养基中包含植物生长和发育所需要的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、维生素及植物激素等，可保证和促进离体组织生长；培养基中的植物激素含有生长素和细胞分裂素等，可很好地调节植物细胞的脱分化和再分化；而一些有机添加剂如甘氨酸可促进细胞的再分化。无土栽培一般用液体培养，仅由植物必需的矿质元素与基质组成，并不需要有机添加物，但培养液中应通入氧气。两种培养基之间最大的区别就在于是否添加有机物。

7个体发育、胚胎发育和胚后发育有何不同？

个体发育是指从受精卵开始，直到发育成性成熟个体的过程，可分为胚胎发育和胚后发育两个阶段；胚胎发育是指受精卵发育成为幼体（未从卵膜孵化出来或未从母体内生出来）的过程；胚后发育是指幼体从卵膜孵化出来或从母体内生出来以后，直至发育成性成熟个体的过程。

8什么是全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞？

全能干细胞是指具有无限分化潜能，能分化成所有组织和器官的干细胞，也就是说具有形成完整个体的分化潜能，胚胎干细胞就属于这一种；胚胎干细胞在进一步的分化中，可形成各种组织干细胞，又称多能干细胞，它具有分化出多种细胞组织的潜能，但不能发育成完整的个体，比如造血干细胞；多能干细胞进一步分化，可形成专能干细胞。专能干细胞只能分化成某一类型的细胞，比如神经干细胞、表皮干细胞就属于专能干细胞。

9超数排卵和冲卵有何区别？

超数排卵是指给供体母畜注射促性腺激素，使其发情，一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的成熟卵子，经合理的人工授精方法，可以获得数量较多的可移植胚胎；冲卵则是指用配制好的冲卵液，借助特制的冲卵装置，将供体母畜子宫或输卵管中的胚胎冲洗出来。

特别提醒，冲卵不是指把卵子冲出来。

10为何完成减数第二次分裂后细胞中只有2个极体？

经典的减数分裂是1个初级卵母细胞经过连续的两次分裂形成1个卵细胞和3个极体。很多哺乳动物在排卵前后，卵泡中的卵母细胞开始恢复减数分裂，1个初级卵母细胞经减数第一次分裂形成1个次级卵母细胞和1个第一极体，然后次级卵母细胞再进入减数第二次分裂并停留在减数第二次分裂中期，直到受精后才完成减数第二次分裂，形成1个受精卵，并排出1个第二极体。在人类以及大部分哺乳动物中，第一极体往往不再进行减数第二次分裂，只有少部分哺乳动物的第一极体才会分裂形成2个第二极体。所以，在实践操作中，往往只会观察到卵子受精时2个极体，即减数第一次分裂形成的第一极体和减数第二次分裂形成的第二极体。

11胚胎移植时对供、受体注射的为何不是性激素？

动物体内的激素调节是负反馈调节方式，如果直接对生物注射性激素，不仅达不到预期效果，而且会使动物内分泌紊乱，甚至会使动物的性腺萎缩。促性腺激素是由垂体合成分泌，它的功能是促进性腺发育、性激素合成和分泌以及生殖细胞生成。第一次对供体和受体同时注射促性腺激素是配合孕激素起辅助作用，促进它们同期发情，第二次对供体注射的目的是使其超数排卵。

12对囊胚阶段的胚胎进行分割时，为什么要将内细胞团均等分割？

内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养。若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育能力强，少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育等问题。

——陈德运.细胞工程和胚胎工程问题解析.生物学教学.2011年第9期

过期的vc

为毛当时我没赶上买元老，现在要苦逼的回帖