在“观察DNA、RNA在细胞中的分布”实验中,甲基绿、吡罗红为什么不分开使用而要混合使用呢?为了弄清楚该问题,笔者用洋葱鳞茎叶片内表皮分别做以下实验,具体见表1。 用甲基绿吡罗红混合液染色时,甲基绿易与聚合程度高的DNA结合,而使之染为绿色,吡罗红则易与聚合程度低的RNA结合,而使之染为红色;若甲基绿和吡罗红单独使用时,则细胞内的DNA和RNA均可与之结合,结果DNA和RNA均被染为绿色或红色。细胞核对甲基绿或吡罗红的亲和力比细胞质强,这是由于细胞核中的核酸比细胞质更密集,因此2种染液都使细胞核染色深,细胞质染色浅;细胞核被用甲基绿吡罗红混合液染色与被用甲基绿单独染色,存在一定差异,单独染色偏绿一些,混合液染色偏蓝一些,这说明用混合液染色时细胞核被甲基绿染色的同时也被吡罗红染色,只不过吡罗红着色很浅,对甲基绿染色效果影响甚微。 甲基绿和吡罗红都易与DNA结合而被染成相应的深色,但甲基绿与DNA结合能力比吡罗红强且稳定;已被甲基绿染色的DNA再难以被吡罗红染色,而已被吡罗红染色的DNA易被甲基绿再染色;RNA与吡罗红结合能力比DNA强。因此,用甲基绿吡罗红混合液染色时,DNA首先与甲基绿结合,而使之染为绿色,而不再与吡罗红结合;RNA则与吡罗红结合,而使之染为红色。用混合液染色,2种染液基本互不影响。 总之,在观察DNA、RNA在细胞中的分布实验中,甲基绿、吡罗红最好混合使用,否则实验效果不好,或者不能区别出DNA和RNA在细胞中的分布情况。 ——王志宏.甲基绿吡罗红必须混合使用吗.实验教学与仪器.2011年第9期
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