教材旁栏有一道思考题:两种刚果红染色法各有什么优缺点呢?关于方法二的缺点,教师参考用书中给出的答案是:由于在土豆汁中含有淀粉类物质,会使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。对于该答案,很多师生则有疑惑:既然会出现假阳性,为什么要配制这个含有土豆汁的培养基呢? 要解答上述疑问,首先要明确两点:①用稀释涂布平板法对微生物进行鉴定,要求微生物在培养基上能够繁殖成一个菌落;②微生物对碳源的利用是有选择性并且有一定顺序的,这些是由微生物自身的酶系统决定的。一般情况下,微生物会优先利用淀粉,淀粉耗尽才会利用纤维素。在以纤维素为唯一碳源的固体培养基上,微生物繁殖的速度非常慢。而土豆汁作为培养基中一种天然的成分,除含有淀粉外,还含有丰富的钙、磷、铁、钾等矿物质,以及维生素C、维生素A和B族类维生素,营养丰富,有利于微生物的繁殖。 综上所述,在鉴别培养时,由于涂布使菌体密度大大下降,为了让单个菌体更好地存活下来并形成菌落,于是在鉴别培养基中加入一定量的土豆汁。当然,一开始能分解淀粉的微生物也会繁殖,但由于加入的淀粉量较少,在淀粉分解菌还未能发展到一个菌落的时候淀粉就用完了,只剩下纤维素。 此时,纤维素分解菌则能继续利用纤维素繁殖成一个菌落,而淀粉分解菌因为不能继续利用纤维素使增殖受阻(这也是教师参考用书上说明只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊的原因)。所以,本实验中加入土豆汁的原因是为了利于纤维素分解菌更好地繁殖,以便形成菌落。 ——苑国英.关于“分解纤维素的微生物的分离”两个问题的探讨.生物学教学.2014年第11期
|