双缩脲试剂能检测二肽吗？

秦四哥

不管是原人教版教材还是不同版本的新课程标准高中《生物》教材中，双缩脲试剂都被用于蛋白质的定性鉴定或检测。什么是脲？为什么叫双缩脲？双缩脲和双缩脲试剂有何关系？双缩脲试剂能用于二肽的检测吗？以下简单介绍有关知识。

1 脲和双缩脲

脲就是尿素，双缩脲是将尿素缓慢加热至熔点（约150~160℃，温度过高则分解）时，两分子尿素间失去一分子氨缩合而成的，反应式为：

                              

正是因为该物质是由两分子脲缩合而成的，故名双缩脲（或称二缩脲、缩二脲、氨基甲酰脲、氨缩脲、亚氨基二碳酸二酰胺）。双缩脲为无色针状结晶，熔点为160℃，难溶于水。

2 双缩脲反应和双缩脲试剂

双缩脲在碱性溶液中能与极稀的硫酸铜溶液产生紫红的颜色反应，这个呈色反应叫做双缩脲反应。反应式（其中，Cu与N之间形成两个共价键，两个配位键）如下：

可见，双缩脲试剂最初是指能够提供碱性条件和Cu2+、用以鉴定或检测双缩脲存在的试剂。由于蛋白质分子中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应，因而可用于蛋白质的定性或定量测定。高中教材常用的双缩脲试剂由两种溶液组成：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液。

从上述反应原理可以看出，双缩脲反应不只为双缩脲所特有，凡是分子中含有两个或两个以上肽键（-CONH-），一个肽键和一个-CS-NH2、-CO-NH2、-CH2-NH2、-CRH-NH2、-CHNH2-CH2OH或-CHOHCH2NH2等基团的物质以及乙二酰乙二胺（NH2CO-CONH2)等物质都能发生这种颜色反应。因此，一切蛋白质或除二肽外的肽都有双缩脲反应，换言之，双缩脲试剂不能和二肽发生反应，因为二肽只有一个肽键；同理，双缩脲试剂也不能与尿素反应，因为尿素的两个-NH2连在同一个碳原子上，不具备两个肽键的基本要求。另外，有双缩脲反应的物质不一定都是蛋白质或多肽。NH3也干扰该反应，因为NH3与Cu2+可生成深蓝色的络离子[Cu(NH3)4]2+。还应当指出，该反应用于蛋白质的定性或定量测定时，所产生的颜色深浅与蛋白质的浓度成正比，而与蛋白质的分子量及所含的氨基酸残基成分无关。

——乔玉晶.双缩脲试剂能和二肽反应吗.生物学教学2008年第12期